冷冻卵子的过程是怎么样的
首先,卵子收集。女性在接受医疗机构的体检后,在一定期限内按规定使用促排卵药物,人为增加女性体内促进排卵的激素水平,卵巢会一次性成熟多颗卵子,然后在规定时间由医生收集即可。B超引导下的经阴道收集卵子的过程并不恐怖,目前的医疗水平也可以保证做到无痛,时间不会超过30分钟。
其次,冷冻。在-196摄氏度液氮中保存的卵子新陈代谢已经停止,可以一直保存下去没有期限。到现在为止,冷冻卵子成功受孕的最长冷冻年限是12年。但这毕竟是一项只开展了十几年新的技术,还需要更多更深入的研究。
冷冻精子技术先于冷冻卵子数十年,目前已经发展成熟,而冷冻卵子技术仍有很大的发展空间。这并非是研究者有性别歧视才先选择先发展冷冻精子技术,而是与冷冻精子相比较,冷冻卵子本身的所遇到的问题确实更多,更复杂。
卵子作为人体最大的细胞,体积上大于精子,含水量也高于精子。大家都知道,水结冰时,会形成结晶,体积也会变大。如果是冷冻生殖细胞的话,细胞内的水结晶可能损伤细胞内的细胞器,而体积增大甚至可能直接把细胞膜胀破,直接宣告生殖细胞死亡。所以,不管是使用程序化冷冻(在程序冷冻仪的特定设定下降温和冷冻,最后置于液氮中保存)还是采用超高速的玻璃化冷冻(卵子在冷冻保护剂里进行预处理后,用极快的速度直接将卵子置于液氮中冷冻保存),冷冻前的脱水就显得极其重要。虽名为脱水,但实际上是用细胞保护剂将生殖细胞中的水置换出来。
可成熟的卵细胞这个人体最大的细胞含有大量的水分,比表面积(表面积/体积)小(比表面积与物质交换速率呈正相关),细胞膜对温度变化的耐受能力和通透性都比较差,这些都会让细胞保护剂渗入较困难。脱水不充分的话,在降温过程中就易形成冰晶,损伤细胞膜和细胞器导致存活率降低。可细胞保护剂同时又具有细胞毒性,高温(4-37摄氏度)长时间接触同样可能导致细胞死亡。
所以,尚未完全成熟的卵细胞,就是一个相对妥协的选择,它含水量没成熟卵细胞那么多,细胞膜通透性还没变得那么差,能让细胞保护剂在尽可能短的时间置换出卵细胞内尽可能多的水。
冷冻生殖细胞的终极目标就是解冻后仍具有生殖活性。可冷冻加解冻的过程中,不可避免地会给细胞带来一些损伤,有些损伤可能直接导致细胞死亡,有些虽然不会令细胞死亡,却可能导致难以受孕。不过,有研究表明,解冻后,有些细胞器的损伤是可以自我修复,要找准时机,及时完成受精。
所以, 冷冻卵子的保护剂的成分、配比,解冻后受精的时机,对冷冻卵子的冷冻、复苏、受精和之后的发育,都是很重要的影响因素。
跟冷冻精子相比,冷冻卵子技术还未达成熟,但以目前技术来说,已经足以在临床开展工作应用。事实上,世界范围内,特别是美国、英国、意大利等国,冷冻卵子技术早就走出实验室,进入临床应用。
最后:复苏冻卵。
存活率:根据美国冷冻卵子机构的数据,38岁女性冷冻卵子的解冻复苏率及之后的受孕率大致都为75%。也就是说,如果冷冻了10颗卵子,那解冻后复苏的大概只有7颗,能成功受精发育为胚胎的有5-6颗,而为了保证受孕成功,通常会移植3-4个胚胎。这也是为什么做一次人工受精通常要存储10颗卵子。另外,解冻复苏率和受孕率也受卵子自身质量的影响。
